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大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c) ELISA試劑盒

  • 產品型號:
  • 產品時間:2024-08-09
  • 簡要描述:上海慧穎生物專業供應大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c) ELISA試劑盒,另供應人elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、兔elisa試劑盒等眾多種屬,歡迎訂購,更多elisa試劑盒、檢測試劑盒、elisa試劑盒說明書,正品保證,*,咨詢!/
  • 產品簡介

                 大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c) ELISA試劑盒

            大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c) ELISA試劑盒使用說明書

實驗原理:

本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 HbA1c 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 HbA1c 與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠 HbA1c ,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的 Streptavidin 與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,zui后加終止液硫酸,在 450nm 處測 OD 值, HbA1c 濃度與 OD 值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中 HbA1c濃度。

試劑盒組成(2-8℃保存)

酶標 板( Coated Wells )

96 孔

酶標抗體工作液( Enzyme Conjugate

12ml

10 ×標本稀釋液( Sample Buffer )

12ml

20 ×濃縮洗滌液( Wash Buffer )

50ml

標準品( Standards ): 2000%/ 瓶

2 瓶

底物工作液( TMB Solution )

12ml

*抗體工作液( Biotinylated Antibody )

12ml

終止液 ( Stop Solution )

12ml

準備試劑與收集血樣

1.收集標本:血清、血漿( EDTA )、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存 48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃ 或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。 血清測定前用標本稀釋液作 1  20  稀釋。

2.標準品液配制:使用前加入 1ml 蒸餾水 混勻,配成 2000% 的溶液 。 設標準管 8 管,*管加標本稀釋液 900ul,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在*管中加入 2000% 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出 500ul 棄去。第八管為空白對照。

3.10 ×標本稀釋液用蒸餾水作 1:10 倍稀釋( 示例: 1ml 濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例: 1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

檢測程序

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入*抗體工作液 100ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 60 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液 100ul 。將反應板置 37 ℃ 30 分鐘。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液 100ul ,置 37 ℃ 暗處反應 15 分鐘。

8.  每孔加入 100ul 終止液混勻。

9.  30 分鐘內用酶標儀在 45 0nm 處測 吸光值。

結果計算與判斷

1. 所有 OD 值都應減除空白值后再行計算。

2. 以標準品 200 、 100 、 50 、 25 、 12.5 、 6.25 、 3.12 、 0 % 為橫坐標, OD 值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。

3. 根據樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應 HbA1c 含量 即可 。

試劑盒性能

 1.   靈敏度 : zui小的 HbA1c 檢測濃度小于 1.5% 。

2. 特異性: 可同時檢測重組或天然的大鼠 HbA1c 。 不與 大鼠其它細胞因子有交叉反應。

3. 重復性:板內、板見變異系數均小于10 %。

注意事項

 1.   以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。

  2.   洗滌過程 很關鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及 OD 值錯誤地升高。

  3.   板條開封后剩余板條要再封好,保持 板條干燥 。

  4.   本試劑盒宜置 4o C 冰箱保存。

  5.   本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!

 

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