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ELISA試劑盒質量控制(三)

發布時間:2012-08-15瀏覽:2035次

 ELISA試劑盒質量控制主要在四方面,質量改進(QI)、空間質量評價、室內質量控制程序和血清質量控制,我們稱之為ELISA質量四部曲,下面我們逐一介紹:

臨床檢驗的檢測結果,每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍,以臨床上不造成誤診與漏診為準,通過以下步驟來確定質控范圍。

一、*條件下的測定誤差

    *條件下已知值質控血清變異(optimal conditions variance,簡稱OCV)的測定:在本實驗室*條件下(包括操作者、試劑、儀器等)檢測質控血清20-30次,測得結果計算,求出該組數據的均值和標準差(SD)表示該實驗室的*工作質量。

    現舉例說明HBsAg ELISA法檢測時OCV的測定。使用的質控制血清為臨界血清,HBsAg濃度為5ng/ml。在該實驗室中選擇素質、操作zui熟練的技術員進行認真地專門測定,選用*的試劑盒,檢測之前,將恒箱、加樣器等認真校正、調校正、調試,使用新的加樣吸頭等,即在*、的條件下進行檢測。除質控血清外同時測定陰性對照品和陽性對照品。并作雙份測定,得出2個吸光值(A值),求出X。連續作20次,求出20個X,即X1……X20。從這20個數據中,求出OCV的X和SD。

二、已知值的血清在常規檢驗條件下的誤差

    常規條件下已知值質控血清變異(routine conditions variance-known value,簡稱RCVK)的測定:做常規檢驗的技術人員,在常規檢驗的條件下,將質控血清放在常規檢測樣本中,進行20次檢驗,結果計算同OCV法。一般認為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內可以接受。若太大應該查找原因,使其向OCV的SD值靠近。在改進實驗室條件后(例如較正加樣器,糾正洗板操作,調正溫育溫度等),重新進行RCVK的測定。如果RCVK的SD值更小,說明OCV不是*條件下測定的,應重新再測OCV。常規條件下,RCVK肯定要比OCV大。通過質控控制各項條件,使RCVK的數據盡可能接近OCV值。RCVK的數據反映該實驗室日常工作的質量,用于作質控圖,對室內檢驗的結果進行控制,每日檢驗的結果,報告能否發出。

三、未知值的血清在常規檢驗條件下的誤差

    常規條件下,未知值質控血清變異(routine conditions variancl-unknown value 簡稱RCVU)的測定:有時為了避免主觀性,再作RCVU測定。測定步驟同RCVK,但檢測的操作者不知質控血清的定值,或在操作者不知哪份是質控血汪清的條件下進行常規檢驗,以排除操作者的主觀性。在此不再舉例說明。

四、臨床應用的要求

    對任何一個試驗都應確定一個允許的誤差范圍,前題是滿足臨床要求。如允許誤差定得過小,在臨床上不存在任何意義,但為了符合該規定卻要花費很大人力、物力和時間。相反,如果將允許誤差定得過大,將使監測系統察覺不到臨床上要求檢出的誤差,失去質控的意義。

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